使用 SDS-PAGE 一步法凝膠快速制備試劑盒時,還可從環境、設備清潔、試劑特性等角度把控細節,進一步保障實驗質量:
環境因素把控
設備深度清潔
電泳槽定期維護:電泳槽使用后,需清洗殘留的緩沖液和凝膠碎屑。長期不清理,殘留物質會附著在電泳槽內壁,影響后續凝膠灌注的平滑度,甚至可能與凝膠發生反應,導致條帶異常。清洗時可用溫和的去污劑浸泡,再用大量蒸餾水沖洗干凈,晾干備用。
移液槍校準與清潔:定期對移液槍進行校準,確保量取試劑體積準確。同時,每次使用后及時清理移液槍槍頭殘留試劑,避免干涸堵塞,若移液槍不慎接觸污染試劑,需拆卸進行深度清潔,防止交叉污染影響凝膠制備。
試劑特性利用
觀察試劑顏色變化:部分試劑盒中的預混試劑可能含有顯色劑,用于指示試劑是否變質或成分是否正常。使用前觀察試劑顏色,若與標準顏色存在明顯差異,如褪色、變色等,可能表明試劑失效,應謹慎使用。
利用試劑密度差異:在灌注凝膠時,若凝膠溶液與電泳槽壁之間存在小氣泡難以去除,可利用溶液密度差異。用微量移液器吸取少量密度稍大的甘油溶液,沿氣泡邊緣緩慢注入,甘油會將氣泡擠出,且甘油對凝膠聚合和電泳過程無明顯不良影響。